01.根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求選擇合適的孔徑

孔徑通常由您的應(yīng)用或使用目的來(lái)決定。支原體可以用0.1μm孔過(guò)濾器去除。大多數(shù)培養(yǎng)基、緩沖溶液、生物液和氣體的常規(guī)實(shí)驗(yàn)室除菌通常采用0.22μm孔過(guò)濾器完成。溶液和溶劑的澄清和預(yù)過(guò)濾最好用0.45μm或孔徑的過(guò)濾膜操作。

請(qǐng)參考下方，來(lái)為您的應(yīng)用選擇匹配的推薦膜和孔徑。

# 0.1um去除支原體

# 0.22um水性溶液的除菌和超凈處理、溶劑的超凈處理（HPLC）

# 0.45um水性溶液的澄清、溶劑的澄清（HPLC）

Tip！

當(dāng)試圖控制支原體時(shí)，可同時(shí)加入環(huán)丙沙星過(guò)濾鹽酸鹽（HCl）。它是一種4-氟喹諾酮類抗生素常用來(lái)控制支原體受感染的污染細(xì)胞系

02.為您的應(yīng)用選擇最佳濾膜材質(zhì)

Tip！

您的過(guò)濾器裝置必須和樣品的化學(xué)性質(zhì)*相容。一些過(guò)濾膜含有可能對(duì)一些應(yīng)用造成干擾的無(wú)毒的潤(rùn)濕劑。另一些濾膜可能結(jié)合蛋白質(zhì)或其它大分子，從而導(dǎo)致過(guò)濾器過(guò)早堵塞或高價(jià)值樣品的損失。因此，了解樣品性質(zhì)以及濾膜對(duì)與之接觸的溶液的潛在影響是非常重要的。

聚醚砜(PES):濾膜強(qiáng)烈推薦用于過(guò)濾細(xì)胞培養(yǎng)基。PES結(jié)合蛋白質(zhì)的能力和可提取物含量都非常低。PES膜的流速也高于纖維素或尼龍膜。

#醋酸纖維素酯膜(CA):濾膜對(duì)多數(shù)大分子的結(jié)合親和力非常低，尤其適用于要求低蛋白結(jié)合作用的應(yīng)用，例如含血清培養(yǎng)基的過(guò)濾。

#尼龍膜(聚酰胺NYLON):本質(zhì)上是親水性的，推薦用于對(duì)可提取物含量要求非常低的應(yīng)用，因?yàn)樗鼈儾缓魏螡?rùn)濕劑、清潔劑或表面活性劑。尼龍膜的耐化學(xué)性能較強(qiáng)，適于過(guò)濾腐蝕性較大的溶液，例如酒精和DMSO。

#特氟龍®（PEFE，聚四氟乙烯）:膜本質(zhì)上并且永遠(yuǎn)是疏水性的，適于過(guò)濾氣體，包括增濕的空氣。特氟龍膜的耐化學(xué)性良好，這使其非常適于過(guò)濾其它濾膜不能過(guò)濾的溶劑或其它腐蝕性化學(xué)品。由于其疏水性，特氟龍膜在過(guò)濾水性溶液以前必須用溶劑（例如乙醇）預(yù)先潤(rùn)濕。

03.選擇合適濾膜直徑以優(yōu)化流速和膜通量

選擇一個(gè)具有充足的容量或通量，從而能夠快速高效地處理所有樣品的過(guò)濾器。這主要取決于膜的有效表面積。

#過(guò)濾膜直徑50mm 有效過(guò)濾面積19.6cm2，預(yù)計(jì)通量150-750ml

#過(guò)濾膜直徑70mm 有效過(guò)濾面積39.5cm2，預(yù)計(jì)通量500-2500ml

#過(guò)濾膜直徑91mm 有效過(guò)濾面積65cm2，預(yù)計(jì)通量1000-5000ml

較低值為粘性或含顆粒溶液的典型值；較高值為緩沖液或無(wú)血清培養(yǎng)基的典型值

Tip！

1.離心將去除大部分懸浮顆粒并減少過(guò)濾器堵塞，改善流速和吞吐量。

也可以預(yù)過(guò)濾減少顆粒負(fù)荷和過(guò)早的膜堵塞。

2.液體溫度的影響

對(duì)于大多數(shù)應(yīng)用，在室溫下過(guò)濾溶液沒有問題。通常增加溶液的溫度會(huì)增加流速。例如，將細(xì)胞培養(yǎng)基的溫度從4℃增加至37℃會(huì)使流速加倍。這最可能是由于培養(yǎng)基粘度的下降。但是，在一些情況下，較低溫度下過(guò)濾會(huì)增加總通量，對(duì)血清等含蛋白質(zhì)和脂肪的溶液尤其如此。

3.壓差的影響

對(duì)于真空過(guò)濾，建議采用400mm Hg(7.73 psig)的壓差（真空）。再增加壓差只會(huì)使流速提高一點(diǎn)，但是可能導(dǎo)致過(guò)量泡沫的形成，因?yàn)闉V出液中的氣體會(huì)從溶液中逸出產(chǎn)生氣泡。在過(guò)濾加入碳酸氫鹽緩沖液的細(xì)胞培養(yǎng)基時(shí)這個(gè)問題尤其突出。在較高的壓差下，培養(yǎng)基中溶解的二氧化碳將很快逸出，導(dǎo)致pH值上升，如果培養(yǎng)基中含有血清蛋白則形成過(guò)量的泡沫。